載體對(duì)短程硝化生物膜特性的影響

序批式生物膜反應(yīng)器(SBBR)，即通過(guò)在SBR反應(yīng)器中投加生物膜填料，并采用序批模式運(yùn)行的新型工藝。該工藝兼具SBR法和生物膜法的優(yōu)點(diǎn)，不但能提升抗沖擊負(fù)荷的能力，也保留了SBR控制靈活方便的特性，具有良好的發(fā)展前景。SBBR反應(yīng)器可以將生物膜中微生物的污泥齡控制在較高水平，有利于世代時(shí)間較長(zhǎng)的硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)，有利于硝化過(guò)程的進(jìn)行。

傳統(tǒng)脫氮主要利用的是全程硝化反硝化工藝，即氨氧化細(xì)菌(AOB)將污水中的NH4+-N氧化為NO2-N，再由亞硝酸鹽氧化細(xì)菌(NOB)將NO2--N氧化為NO3--N。而短程硝化是將硝化反應(yīng)控制在NO2-N階段，可縮短反應(yīng)流程，減少建設(shè)投資，節(jié)省曝氣能耗和反硝化碳源，具有良好的應(yīng)用前景。短程硝化一般通過(guò)富集AOB和抑制NOB來(lái)實(shí)現(xiàn)。AOB的氧飽和常數(shù)較NOB低，說(shuō)明AOB能夠更好地適應(yīng)低DO的環(huán)境。而生物膜中存在一定的溶解氧梯度，因此在對(duì)DO的競(jìng)爭(zhēng)方面，AOB比NOB更有優(yōu)勢(shì)，能夠獲得更好的生長(zhǎng)環(huán)境，有利于短程硝化的實(shí)現(xiàn)。另外，研究表明，間歇進(jìn)水的方式比連續(xù)進(jìn)水更容易實(shí)現(xiàn)短程硝化，其可以通過(guò)控制DO、游離氨、溫度、pH等參數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)短程硝化。

本研究以模擬城市生活污水作為處理對(duì)象，采用SBBR反應(yīng)器考察了不同載體對(duì)短程硝化生物膜特性的影響，以及對(duì)高DO的沖擊適應(yīng)性，以期找到更適合短程硝化啟動(dòng)和運(yùn)行的填料。

1、材料與方法

1.1 試驗(yàn)裝置

SBBR反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)示意如圖1所示。反應(yīng)器為圓柱形，直徑20cm，有效水深30cm，有效容積約為9.4L。反應(yīng)器材質(zhì)為有機(jī)玻璃，裝置底部設(shè)有剛玉曝氣盤(pán)，通過(guò)轉(zhuǎn)子流量計(jì)與曝氣泵相連。SBBR反應(yīng)器放置于25℃的恒溫槽內(nèi)，裝置上部分別放置DO探頭和pH探頭，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)器內(nèi)溫度、DO和pH的變化。

1.2 試驗(yàn)水質(zhì)和接種污泥

試驗(yàn)中的3組反應(yīng)器均采用人工配水，其中，進(jìn)水NH4+-N60mg/L左右，由氯化銨提供;進(jìn)水COD300mg/L左右，由醋酸鈉提供;進(jìn)水TP約為6mg/L，由磷酸二氫鉀提供。1L污水中投加0.5mL營(yíng)養(yǎng)液，為微生物生長(zhǎng)提供必要的微量元素。營(yíng)養(yǎng)液主要成分：FeSO4?7H2O1mg/L，H3BO30.2mg/L，CuSO4.5H2O0.1mg/L，MgSO4?7H2O0.1mg/L，MnCl2?4H2O0.2mg/L，ZnSO4?7H2O0.2mg/L，CoSO4?6H2O0.3mg/L，NiCl2?6H200.2mg/L。根據(jù)反應(yīng)器運(yùn)行情況投加碳酸氫鈉，pH維持在7.6~7.8。接種污泥為北京市某污水處理廠(chǎng)回流污泥，其硝化性能良好，MLVSS/MLSS在0.7左右，SVI在90左右。

1.3 試驗(yàn)方案

試驗(yàn)共設(shè)置A、B、C3個(gè)試驗(yàn)組，各組試驗(yàn)條件與采用的反應(yīng)器均相同，選擇鮑爾環(huán)和海綿2種類(lèi)型的載體進(jìn)行填充，填充比25%。其中，A組投加鮑爾環(huán)填料，B組投加海綿填料，C組投加體積比為1：1的海綿和鮑爾環(huán)混合填料。鮑爾環(huán)填料的比表面積為280~670m/m，孔隙率為50%~75%，吸附能力較弱。海綿填料的比表面積為2500m/m左右，孔隙率為75%~90%，吸附能力較強(qiáng)。

A、B、C3組試驗(yàn)均采用完全排泥法進(jìn)行“掛膜啟動(dòng)”。即首先進(jìn)行48h悶曝，然后排空反應(yīng)器內(nèi)的活性污泥，從而在生物膜掛膜階段消除反應(yīng)器內(nèi)活性污泥對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的競(jìng)爭(zhēng)。通過(guò)對(duì)比3組試驗(yàn)的短程硝化運(yùn)行效果和“掛膜”情況等，并結(jié)合EPS、SEM和高通量分析，得出不同填料投加對(duì)短程硝化特性的影響。在初始階段，控制曝氣時(shí)間為6h，以出水NH4+-N<5mg/L作為硝化反應(yīng)完全的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行監(jiān)測(cè)調(diào)整，防止出現(xiàn)過(guò)量曝氣，并定期觀(guān)察填料上生物膜生長(zhǎng)狀況，最終實(shí)現(xiàn)短程硝化的啟動(dòng)和穩(wěn)定運(yùn)行。

試驗(yàn)中采用氨氮去除率(AAR)評(píng)價(jià)硝化性能，采用亞硝酸鹽氮積累率(NAR)評(píng)價(jià)短程硝化的成功啟動(dòng)，以NAR的穩(wěn)定性作為短程硝化穩(wěn)定運(yùn)行的指標(biāo)參數(shù)。

1.4 分析項(xiàng)目與方法

NH4+-N采用納式試劑分光光度法測(cè)定;NO2-N采用N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法測(cè)定;NO3-N采用麝香草酚分光光度法測(cè)定;MLSS和MLVSS采用質(zhì)量法測(cè)定。DO、pH和溫度采用WTW在線(xiàn)監(jiān)測(cè)探頭進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

生物膜內(nèi)總EPS采用熱處理方法提取，采用考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定總蛋白含量，采用蒽酮比色法測(cè)定總糖含量。生物膜樣品送到生工生物工程(上海)股份有限公司進(jìn)行高通量測(cè)序。

2、結(jié)果與討論

2.1不同填料試驗(yàn)組的掛膜啟動(dòng)

分別對(duì)A、B、C3組反應(yīng)器進(jìn)行掛膜啟動(dòng)，以?huà)炷ぬ盍仙仙锪康亩嗌賮?lái)指示“掛膜”是否成功，并對(duì)3組試驗(yàn)中“掛膜”時(shí)間的長(zhǎng)短進(jìn)行比較。圖2為反應(yīng)器啟動(dòng)和穩(wěn)定運(yùn)行過(guò)程中生物量和ARR的變化情況。

MLVSS表示活性污泥混合液中有機(jī)固體物質(zhì)的濃度，可以用來(lái)表征活性污泥中生物量的濃度水平。從圖2(a)可以看到，3個(gè)試驗(yàn)組在悶曝48h并完全排空活性污泥后，生物量的變化規(guī)律有較大差異。A組第1天截留的生物量最少，MLVSS為116mg/L，說(shuō)明鮑爾環(huán)的截留能力較差;隨著時(shí)間的增加，A組生物量逐漸增加，14d以后MLVSS穩(wěn)定在2021mg/L左右，說(shuō)明掛膜啟動(dòng)成功。B組第1天截留的微生物最多，MLVSS為2395mg/L，說(shuō)明海綿具有很強(qiáng)的截留能力，這和海綿的多孔特性相關(guān)。由于海綿初期只有物理攔截作用，隨著水力剪切和進(jìn)水的稀釋?zhuān)锪恐饾u減低，第5天達(dá)到最低值，MLVSS為1656mg/L，但仍是同期3組中的最高值;之后系統(tǒng)內(nèi)生物量逐漸升高，10d后MLVSS穩(wěn)定在2100mg/L左右，成功實(shí)現(xiàn)了掛膜。C組第1天的MLVSS為1354mg/L，其變化趨勢(shì)介于A組與C組之間，11d后實(shí)現(xiàn)了成功掛膜。3組掛膜成功后的生物量大致相同，MLVSS均在1950~2200mg/L范圍內(nèi)。

由圖2(b)可知，A、B、C3組試驗(yàn)中ARR的變化規(guī)律與生物量相似，且對(duì)ARR的去除分別在14d后、10d后、11d后達(dá)到穩(wěn)定。3組試驗(yàn)達(dá)到穩(wěn)定后的ARR均保持在80%左右，差異不大。試驗(yàn)結(jié)果表明，海綿填料由于具有比表面積大、吸附能力強(qiáng)的特性，在前期可以吸附截留更多的微生物，有利于微生物的附著和增殖，能夠更快地實(shí)現(xiàn)掛膜啟動(dòng)。

在實(shí)際運(yùn)行中，發(fā)現(xiàn)B組曝氣能耗相對(duì)較大。由于海綿填料具有一定厚度，需要保持較高的曝氣量，并增加額外的攪拌裝置，才能使90%以上的海綿填料呈流化狀態(tài)，使海綿內(nèi)部的微生物與溶解氧和污染物能夠充分接觸。此外，由于海綿填料的機(jī)械強(qiáng)度較低，長(zhǎng)期的機(jī)械攪拌和水力剪切容易造成填料的磨損和破裂，而重新投加補(bǔ)充新填料又需要一定的培養(yǎng)周期，會(huì)影響處理系統(tǒng)的處理效率，并對(duì)出水水質(zhì)造成影響。鮑爾環(huán)填料雖然掛膜時(shí)間較長(zhǎng)，但僅靠曝氣帶動(dòng)的水力攪拌就可達(dá)到較好的流化狀態(tài)，且鮑爾環(huán)填料為剛性填料，不易發(fā)生磨損和破裂。

2.2 DO對(duì)不同填料試驗(yàn)組短程硝化穩(wěn)定性的影響

為了研究DO對(duì)不同填料試驗(yàn)組短程硝化穩(wěn)定性的影響，將3組試驗(yàn)均分為3個(gè)階段：第1階段是1~20d的掛膜啟動(dòng)階段，主要完成填料的掛膜和穩(wěn)定運(yùn)行，這一階段控制DO在1mg/L左右;第2階段是21~35d，增加DO至3.3mg/L，用高DO沖擊來(lái)破壞短程硝化;第3階段是36~50d，進(jìn)一步增加DO至5.6mg/L，增加其對(duì)短程硝化的沖擊。不同DO下3組試驗(yàn)AAR和NAR的變化如圖3所示。

研究表明，AOB的氧飽和系數(shù)是0.2~0.4mg/L，NOB的氧飽和系數(shù)是1.2~1.6mg/L。G.Ciudad等研究發(fā)現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)短程硝化需要控制DO<1.4mg/L。也有一些研究表明，在生物膜反應(yīng)器中，可以在較高的DO條件下實(shí)現(xiàn)短程硝化。張永祥等應(yīng)用鮑爾環(huán)填料，通過(guò)控制DO在2.9~5.0mg/L，實(shí)現(xiàn)了短程硝化;周鑫等以海綿作為微生物填料處理NH4+-N廢水，通過(guò)控制DO在0.8~2.6mg/L，實(shí)現(xiàn)了短程硝化，NAR最大值為72.2%。

從圖3可知，在高DO的沖擊下，A組的短程硝化效果保持相對(duì)穩(wěn)定，NAR僅下降了8%左右。而對(duì)于B組與C組，高DO的沖擊破壞了其短程硝化效果。第50天，B組的NAR降低為41.5%，C組的NAR降低為65.0%。從短程硝化運(yùn)行的抗DO沖擊特性來(lái)說(shuō)，3個(gè)試驗(yàn)組的抗沖擊能力從高到低依次為A>C>B。

鮑爾環(huán)與海綿填料在抵抗高DO沖擊方面的差異性主要體現(xiàn)在以下3個(gè)方面：

(1)生物膜厚度的差異。鮑爾環(huán)填料與海綿填料在達(dá)到穩(wěn)定運(yùn)行后的NAR與生物量基本相同，但是鮑爾環(huán)填料的比表面積遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于海綿填料，這說(shuō)明鮑爾環(huán)填料上的生物膜厚度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于海綿填料。而生物膜的厚度直接影響到DO的傳質(zhì)效果，生物膜越厚，DO與污染物傳遞到生物膜內(nèi)層的阻力越大，這就導(dǎo)致高DO沖擊下，鮑爾環(huán)填料生物膜內(nèi)部仍能保持合適的低DO環(huán)境，來(lái)維持AOB的富集與NOB的抑制。

(2)EPS的分泌不同。EPS是微生物通過(guò)新陳代謝分泌出來(lái)的高分子聚合物，能夠包裹在微生物細(xì)胞的表面，有利于微生物的聚集與附著生長(zhǎng)，具有保護(hù)和維持生物膜的作用。鮑爾環(huán)填料在低比表面積的情況下，仍然有與海綿填料相同的生物量，這就意味著鮑爾環(huán)填料中微生物分泌的EPS較高，對(duì)生物膜的保護(hù)也較高。

(3)生物膜的分層結(jié)構(gòu)。在鮑爾環(huán)填料的生物膜中，由于生物膜厚度較厚，DO和有機(jī)物在不同厚度的生物膜上具有不同的濃度梯度，這樣微生物就會(huì)根據(jù)對(duì)DO和有機(jī)物的不同需求，在不同的生物膜位置生長(zhǎng)。而在海綿填料中，由于生物膜厚度較低，分層結(jié)構(gòu)不明顯，生物膜很容易被高DO沖擊穿透。

2.3 鮑爾環(huán)與海綿填料的短程硝化特性

鮑爾環(huán)填料和海綿填料均能達(dá)到短程硝化的穩(wěn)定運(yùn)行，為了比較這2種填料的短程硝化效果的差異，在短程硝化穩(wěn)定期(第20天)，對(duì)C組中的鮑爾環(huán)填料和海綿填料分別進(jìn)行了沿程變化小試，結(jié)果如圖4所示。

從圖4可知，試驗(yàn)進(jìn)行1h時(shí)，鮑爾環(huán)填料反應(yīng)器內(nèi)NH4+-N降低了9.61mg/L，而海綿填料反應(yīng)器內(nèi)NH4+-N降低了22.84mg/L。這是因?yàn)楹＞d填料的表面積較大，海綿填料生物膜與進(jìn)水中污染物的接觸面積也較大，污染物能夠更多地被微生物所吸附，從而導(dǎo)致海綿填料反應(yīng)器內(nèi)NH4+-N下降較快。鮑爾環(huán)填料與海綿填料的NH4+-N去除率均在90%左右，鮑爾環(huán)填料的NH4+-N去除率為93.84%，稍高于海綿填料的89.28%。這可能是由于鮑爾環(huán)填料中AOB的活性較海綿填料要稍高一些。對(duì)于2種填料，NO3-N濃度均維持在一個(gè)較低的水平，從試驗(yàn)開(kāi)始到結(jié)束(反應(yīng)6h)，鮑爾環(huán)填料反應(yīng)器中的NO5-N從2.08mg/L升高至4.38mg/L，而海綿填料反應(yīng)器中的NO5-N從1.90mg/L升高至7.56mg/L，說(shuō)明海綿填料中NOB的活性更高一些，鮑爾環(huán)填料對(duì)NOB的抑制作用更強(qiáng)。

2.4 SEM、EPS和高通量分析

在第20天短程硝化穩(wěn)定期，取出C組試驗(yàn)中投加的鮑爾環(huán)填料和海綿填料進(jìn)行SEM分析，結(jié)果如圖5所示。

從圖5可以看到，鮑爾環(huán)生物膜細(xì)胞表面有較多的細(xì)胞間物質(zhì)，生物膜表面較平整光滑;海綿填料生物膜細(xì)胞表面細(xì)胞間物質(zhì)較少，生物膜相對(duì)比較粗糙。生物膜中細(xì)胞間物質(zhì)主要成分是EPS，其對(duì)微生物起到保護(hù)作用，是組成和維持生物膜的重要部分。與海綿填料相比，鮑爾環(huán)填料生物膜中的EPS相對(duì)較多，因此其對(duì)高DO的傳質(zhì)阻力更大，短程硝化抗高DO沖擊的能力更強(qiáng)。

取第37天C組中的鮑爾環(huán)和海綿填料，測(cè)定其生物膜上的EPS。結(jié)果表明，鮑爾環(huán)填料生物膜中的TOC、PN(蛋白質(zhì))、PS(多糖)分別為165、76.8、16mg/L，海綿填料生物膜中的TOC、PN、PS分別為98、51.6、12mg/L，鮑爾環(huán)填料生物膜中的總EPS(TOC)、PN和PS均較顯著地高于海綿填料。同時(shí)，計(jì)算得出鮑爾環(huán)和海綿填料生物膜中的PN/PS分別為4.8、4.3。綜上，可以看出鮑爾環(huán)填料上的生物膜更穩(wěn)定。

對(duì)第37天C組中鮑爾環(huán)和海綿填料上的生物膜進(jìn)行高通量測(cè)序，結(jié)果如圖6所示。

由圖6可以看出，海綿填料生物膜中共有14種主要菌屬，鮑爾環(huán)填料生物膜中共有11種主要菌屬，與海綿填料相比，鮑爾環(huán)上的微生物群落結(jié)構(gòu)更加趨于專(zhuān)性，特別是不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)的占比進(jìn)一步擴(kuò)大，可能表明功能菌群的優(yōu)勢(shì)較為明顯。海綿填料和鮑爾環(huán)填料生物膜樣品的Shannon-Wiener指數(shù)分別為4.2和3.3，表明海綿填料生物膜中的微生物更具多樣性，反過(guò)來(lái)也同樣表明鮑爾環(huán)填料生物膜中的微生物相對(duì)更專(zhuān)性，這也是其生物膜更穩(wěn)定的一種表現(xiàn)。

3、結(jié)論

(1)在25℃條件下，在SBBR反應(yīng)器中分別投加鮑爾環(huán)填料、海綿填料和體積比為1：1的混合填料進(jìn)行掛膜啟動(dòng)，結(jié)果表明，3個(gè)試驗(yàn)組實(shí)現(xiàn)短程硝化所需時(shí)間分別為14、10、11d，氨氮去除率均能達(dá)到80%以上，均能實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的短程硝化。鮑爾環(huán)填料雖然掛膜時(shí)間較長(zhǎng)，但是僅靠曝氣帶動(dòng)的水力攪拌就可以達(dá)到較好的流化狀態(tài)，且較海綿填料節(jié)省能耗，不易發(fā)生磨損和破裂。

(2)SEM分析表明，鮑爾環(huán)填料生物膜中的EPS要多于海綿填料。在高DO沖擊下，鮑爾環(huán)填料中較多的EPS對(duì)高DO的傳質(zhì)有更大的阻力，能夠保持相對(duì)穩(wěn)定的DO梯度，對(duì)內(nèi)部微生物的保護(hù)效果更好，且穩(wěn)定的DO梯度使微生物的種類(lèi)更多樣，分層更合理，生物膜結(jié)構(gòu)更牢固。鮑爾環(huán)填料對(duì)高DO的沖擊適應(yīng)性更強(qiáng)，能夠在高DO下實(shí)現(xiàn)短程硝化的穩(wěn)定運(yùn)行。

(3)EPS分析表明，鮑爾環(huán)填料生物膜中的TOC、PN和PS均較顯著地高于海綿填料，且鮑爾環(huán)生物膜中的PN/PS較高，說(shuō)明鮑爾環(huán)上的生物膜更穩(wěn)定。高通量測(cè)序結(jié)果表明，鮑爾環(huán)填料生物膜中的微生物群落結(jié)構(gòu)相比于海綿填料更加趨于專(zhuān)性，這也是其生物膜較穩(wěn)定的原因之一。（來(lái)源：西安高新區(qū)污水處理有限公司，北京城市排水集團(tuán)有限責(zé)任公司，北京工業(yè)大學(xué)，煤炭開(kāi)采水資源保護(hù)與利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室）