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低碳氮比廢水中總氮鐵屑耦合固相反硝化處理

低碳氮比廢水中總氮鐵屑耦合固相反硝化處理

2024-11-20 10:29:02 0

我國分散式農(nóng)村生活污水、河流湖泊水體等氮污染形勢嚴(yán)峻,且存在低碳氮比問題,而國家對環(huán)境中的TN要求日益嚴(yán)格。目前污水中氮主要通過生物異養(yǎng)反硝化去除,其原理是反硝化菌在缺氧或厭氧環(huán)境下以有機(jī)物作為電子供體,硝氮(NO3--N)為最終電子受體,通過電子傳遞鏈將NO3-依次還原為NO2-、NO、N2ON2。碳源與電子供體會影響反硝化效果,碳源缺乏往往導(dǎo)致NO3-去除率低。低碳氮比污水存在碳源不足的問題,致使總氮(TN)超標(biāo),為提高TN脫除效果,通常需投加額外碳源。固相碳源是一種可替代傳統(tǒng)液相碳源的新型碳源,包括人工合成聚合物、農(nóng)業(yè)廢棄物等,其已被應(yīng)用于地表水、人工濕地、循環(huán)水產(chǎn)養(yǎng)殖等氮的去除中,并取得了一定的效果。植物碳源(如稻殼、秸稈、木屑、蘆葦?shù)?/span>)因其廉價易得逐漸成為研究熱點(diǎn),其主要成分為木質(zhì)纖維素(由纖維素、半纖維和木質(zhì)素組成),木質(zhì)纖維素中的纖維素和半纖維可被微生物降解為小分子有機(jī)物,用于反硝化脫氮。一般植物碳源存在碳源釋放不穩(wěn)定、反硝化率低、有機(jī)物過量釋放等問題。如何在碳源釋放穩(wěn)定的前提下,進(jìn)一步提高碳源水解能力,是植物碳源應(yīng)用的關(guān)鍵。

我國竹資源豐富,竹林面積約占森林面積的3%。同時竹產(chǎn)業(yè)成熟,竹產(chǎn)品獲取方便靈活,是一種潛在的廉價碳源。纖維絮狀竹刨花是竹加工后的產(chǎn)物,主要成分為木質(zhì)纖維素。竹刨花不同于粉碎的竹屑,其具有一定強(qiáng)度與韌性,纖維交互堆疊并具有豐富孔隙,不易堵塞,表面粗糙,利于微生物附著,可作為污水處理填料和反硝化碳源。與一般禾本科農(nóng)業(yè)植物不同,竹為木質(zhì)生物質(zhì),纖維素和木質(zhì)素含量更高,纖維結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜緊密,導(dǎo)致微生物的分解相對困難。木質(zhì)生物質(zhì)的缺點(diǎn)是反硝化率不高,優(yōu)點(diǎn)是利于長期應(yīng)用。

零價鐵具有化學(xué)還原性強(qiáng)、對微生物的生長有益、氧化產(chǎn)物無毒的特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于地下水、廢水污染物的去除等方面。生物反應(yīng)器中的零價鐵可刺激微生物進(jìn)化并增加微生物多樣性,釋放的鐵離子可加強(qiáng)微生物聚集并增加生物量,提高生物降解能力。已有研究將零價鐵與厭氧生物處理方法耦合以去除水中硝氮,結(jié)果表明,耦合體系具有污染物質(zhì)去除率高、性能穩(wěn)定、成本低等特點(diǎn)。納米鐵、鐵粉等粒徑小的鐵雖比表面積大、活性高,但腐蝕過快,不利于長期利用。此外,較小的粒徑尺寸增加了實(shí)際應(yīng)用難度。已有研究顯示,比表面積較低的鐵形態(tài)在水中的腐蝕相對較慢,在強(qiáng)化生物脫氮的過程中,可減少NH4+的形成,是一種較受青睞的鐵形態(tài)。鐵屑是金屬加工后的廢料,不僅成本低,而且比表面積也低于納米鐵或鐵粉等,利于長期應(yīng)用,且其具有較好的機(jī)械與水力特性,更加符合實(shí)際應(yīng)用需求。目前,將鐵屑與竹基固相反硝化系統(tǒng)耦合以強(qiáng)化脫氮的研究鮮見報道。

本研究以纖維絮狀竹刨花為固體碳源和生物膜載體,引入鐵屑,構(gòu)成耦合體系,從而高效去除低C/N比廢水中TN;通過監(jiān)測裝置進(jìn)、出水水質(zhì),考察體系對TN的去除以及有機(jī)物、總鐵的釋放情況等;采用掃描電鏡、高通量測序等表征方法分析微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性,旨在為高效、穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)地去除低C/N比廢水中TN提供技術(shù)參考,同時滿足“十四五”規(guī)劃中“全面提高資源利用效率”“持續(xù)改善環(huán)境質(zhì)量”等的要求。

1、實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料

1)實(shí)驗(yàn)材料。

竹刨花為毛竹制作竹篾過程中的副產(chǎn)物,刨花絲寬0~4mm、厚0~1mm、長1~30cm,整體呈為團(tuán)聚狀。將竹刨花過60目篩,去除粉屑,40℃烘干待用,測得其濕體積密度為182g?L-1。鐵屑為車床鐵加工后的廢料,挑選出寬1.5~3mm,長2~5cm的呈螺旋狀的鐵屑,40℃干燥待用,測得其濕體積密度為0.17mL?g-1。將粒徑為1.5~3cm的鵝卵石與火山巖清洗干燥,用于反硝化裝置的承托層與固定層。實(shí)驗(yàn)中,投加武漢水之國公司(www.szghb.com)生產(chǎn)的復(fù)合脫氮菌劑,以確保反硝化菌的掛膜。

2)實(shí)驗(yàn)廢水。

實(shí)驗(yàn)廢水采用自來水配置,以KNO3N源,KH2PO4P源,加入1mg?L-1微量元素溶液,補(bǔ)充微生物生長所需微量元素。微量元素溶液中微量元素組成包括120mg?L-1ZnSO4?7H2O、20mg?L-1MgSO4?7H2O30mg?L-1KI、30mg?L-1CoCl2?6H2O30mg?L-1CaCl2、20mg?L-1MnCl2。實(shí)驗(yàn)廢水中TN41.62~59.95mg?L-1,COD(9.92±3.36)mg?L-1TP(1.14±0.06)mg?L-1,NO2--N、NH3-N和總鐵基本檢測不到,pH7.29±0.21。

1.2 實(shí)驗(yàn)裝置與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)采用連續(xù)流動態(tài)反硝化裝置(1),反應(yīng)柱為透明有機(jī)玻璃制成,內(nèi)徑為11cm,高為50cm,從下至上分別為鵝卵石承托層(5cm)、填料層(32cm)和火山巖固定層(3cm)。裝置共2組:1號為耦合體系實(shí)驗(yàn)組,其填料層為160g竹刨花、80g鐵屑和1g菌劑,竹刨花逐層鋪設(shè),鐵屑分2次鋪設(shè)于填料層底部,裝填時,將1g菌劑分層鋪灑于填料層中;2號為單純固相反硝化對照組,填料層只有160g竹刨花,和1g菌劑,鋪設(shè)同上,菌劑為武漢水之國復(fù)合脫氮菌劑(主要成分為短小芽孢桿桿菌、臘樣芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌屬微生物及營養(yǎng)劑等,有效活菌數(shù)≥200×108個?g-1)。實(shí)驗(yàn)裝置總有效體積約為2.16L,采用底部連續(xù)進(jìn)水方式,室溫運(yùn)行105d(202159)。先從裝置底部進(jìn)水,使填料完全浸沒,之后停止進(jìn)水并浸泡1周,再開始連續(xù)進(jìn)水并計(jì)時。進(jìn)水流速為2mL?min-1,水力停留時間約為18h。定期測試進(jìn)、出水的TN、COD、總鐵等指標(biāo)。0~73d,進(jìn)水TN約為40mg?L-1;74~105d,進(jìn)水TN升至60mg?L-1左右。根據(jù)進(jìn)水TN質(zhì)量濃度與TN去除效果,運(yùn)行的0~12d設(shè)定為啟動階段,13~73d為階段I,74~105d為階段II

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1.3 分析方法

1)水質(zhì)分析。

采用德國耶拿MultiN/C?2100儀器測定TN,采用重鉻酸鹽法(HJ828-2017)測定COD,采用鄰菲羅啉分光光度法(HJ/T345-2007)測定總鐵,采用N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法(GB/T7493-1987)測定NO2--N,采用納氏試劑分光光度法(HJ535-2009)測定NH3-N,采用鉬酸銨分光光度法(GB11893-1989)測定TP,采用電極(PHB-4)測定pH,所用藥品均為分析純。

2)微生物及分子生物學(xué)分析。

在裝置運(yùn)行的第98天,取裝置內(nèi)部生物膜生長良好的竹刨花進(jìn)行SEM觀察并進(jìn)行16SrRNA測試。選取2~5mm竹刨花填料小塊,使用2.5%戊二醛(電鏡專用)使其固定,使用磷酸緩沖液進(jìn)行清洗,使用乙醇進(jìn)行梯度脫水,再進(jìn)行臨界點(diǎn)干燥和噴金,然后置于SEM電鏡下觀察。實(shí)驗(yàn)前的竹刨花由于沒有生物膜,無需進(jìn)行生物固定操作,直接干燥噴金觀察。取填料層頂部5~7cm厚濕竹刨花,質(zhì)量約為100g,放在裝有純水的燒杯中,用玻璃棒振攪,使其表面生物膜脫落,之后再將竹刨花回填于裝置內(nèi),剩余生物膜溶液離心濃縮至約5mL,低溫保存,用于高通量測序。高通量測序采用MiseqPE250測序模式,選擇16SrRNAV3~V4區(qū)引物338F806R(引物序列ACTCCTACGGGAGGCAGCAGGACTACHVGGGTWTCTAAT)對樣品進(jìn)行測試并分析測試結(jié)果,得到樣品的菌群結(jié)構(gòu)。以上所有表征均由杭州研趣信息技術(shù)有限公司完成。

2、結(jié)果與討論

2.1 有機(jī)物的釋放

有機(jī)物是反硝化的主要電子供體與能量來源,但有機(jī)物過多會引發(fā)二次污染。圖2為實(shí)驗(yàn)裝置進(jìn)、出水COD變化情況。由圖2可知,啟動階段(0~12d),前5d2組出水COD較高(>100mg?L-1),之后迅速降低,9d后,2組出水COD低于50mg?L-1。13~105d(階段I~階段II)2組出水COD基本穩(wěn)定,預(yù)示掛膜成熟,1號和2號出水COD分別為(45.97±6.58)mg?L-1(32.37±9.05)mg?L-1。啟動階段,竹刨花表層可溶性有機(jī)物溶出較多,導(dǎo)致前5d出水COD較高,這確保了生物膜的快速生長。運(yùn)行約12d后,竹刨花表層可溶性有機(jī)物基本消耗完全,微生物主要通過分解、利用竹纖維素獲取能源與電子供體等,但木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)復(fù)雜穩(wěn)定,分解較慢。另外,隨著菌群的逐漸穩(wěn)定,微生物對纖維素類物質(zhì)的分解與利用趨于平衡,隨水流出的有機(jī)物不多,因此,2組出水COD在階段I~階段II基本維持在較低水平。

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在階段I~階段II,1號出水COD整體較2號高42.04%。這是因?yàn)殍F促進(jìn)了微生物的繁殖與酶的分泌,提高了微生物對竹纖維類物質(zhì)的分解。此外,隨著TN負(fù)荷的增加,在階段II,1號和2號出水COD較階段I分別增加9.17%、-16.44%,說明耦合體系有機(jī)物供應(yīng)機(jī)制適應(yīng)性更好。最后,13~105d2組出水COD均值均低于一級A限值(50mg?L-1,GB18918-2002),未出現(xiàn)碳源過度釋放情況。

2.2 TN的去除

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3為實(shí)驗(yàn)裝置TN去除及出水COD/N曲線。在啟動階段,2組出水TN先降低再上升,運(yùn)行12d(階段I和階段II),2組出水TN基本趨于穩(wěn)定。由于N是竹基本組分之一,竹刨花在初始大量釋放有機(jī)物,這些有機(jī)物中的N經(jīng)微生物分解后會增加水中TN,因此,第1天,測量2組出水TN均較高(48.36~52.40mg?L-1)。2~7d,2組出水COD/N均大于4,而滿足或完成反硝化所需的COD/TN比為4~15,說明此時2組有機(jī)物充足,反硝化率高,TN去除率也達(dá)到啟動階段的最大值,分別為89.34%75.98%。這表明2組均形成了較好的脫氮效能,且初期差異不大。8~12d,2組出水COD/N逐漸降至低點(diǎn),第12天,2組出水TN達(dá)到最大值,為18.34~31.96mg?L-1。另外,由圖2可知,運(yùn)行12d后,2組出水有機(jī)物基本穩(wěn)定,體系內(nèi)部相對穩(wěn)定的碳源環(huán)境使得反硝化反應(yīng)趨于平衡,因此,13~105d,2組出水TN也相對穩(wěn)定。

在階段I,運(yùn)行61d,進(jìn)水TN(41.62±1.29)mg?L-1,1號和2號出水TN均值分別為3.03mg?L-121.05mg?L-1,TN去除率分別為(92.79±9.31)%(49.52±12.68)%,1TN去除率比2號高87.36%;且運(yùn)行50~73d,1TN去除率在95%以上,出水TN均值(1.30mg?L-1)低于地表水IV類標(biāo)準(zhǔn)限制1.50mg?L-1(GB3838-2002)。在階段II,運(yùn)行32d,進(jìn)水TN(59.95±1.77)mg?L-1,1號和2號出水TN均值分別為16.01mg?L-140.91mg?L-1,TN去除率分別為70%30%左右,1TN去除率比2號高131.09%??傮w而言,13~105d,耦合體系TN去除率較單純固相反硝化體系高近1倍。

趙文莉等以堿處理玉米芯、零價鐵和活性炭構(gòu)成復(fù)合填料處理低碳氮比污水廠尾水,進(jìn)水NO3-20~30mg?L-1,初期有機(jī)物多,TN去除率達(dá)100%,后有機(jī)物降低,運(yùn)行60d時,TN去除率降為60%左右,碳源不足是限制脫氮的主要因素。在本研究的階段I~階段II,1號出水COD/N均高于2號,說明1號碳源更豐富,因此1TN去除率更高。同時,隨著TN負(fù)荷的增加,2TN去除率均降低,且出水COD/N均小于4。這是因?yàn)橹裰杏袡C(jī)物釋放緩慢,無法完全滿足高負(fù)荷下的碳源需求。另外,從階段I至階段II,1號和2TN削減量((1))分別增加了13.89%-7.44%,這與上文COD變化相似。以上情況說明碳源是影響2組脫氮效能的重要原因。

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式中:?CiTN削減量;C0為進(jìn)水TN質(zhì)量濃度;Cei為出水TN質(zhì)量濃度;i1號或2號反應(yīng)器。

纖維素分解后會釋放腐殖質(zhì)和類蛋白、小分子有機(jī)酸和糖等,而反硝化菌只能利用小分子有機(jī)酸脫氮。鐵可提高復(fù)雜有機(jī)物的降解率,改善碳源分解,從而提高耦合體系TN去除率。但研究顯示,采用植物碳源脫氮時,出水中有機(jī)質(zhì)主要為腐殖質(zhì)和類蛋白等。這類大分子物質(zhì)反硝化菌無法直接利用,需進(jìn)一步分解。因此,2組出水始終殘留有COD而暫時無法用于脫氮,此時,可后接有機(jī)物處理模塊,以進(jìn)一步減少有機(jī)物污染。

2.3 NO2--NNH3-N的積累

4(a)為實(shí)驗(yàn)裝置NO2--N積累情況。反硝化由硝酸鹽還原酶(Nar)和亞硝酸鹽還原酶(Nir)等完成。碳源不足,部分NO2-無法還原,造成NO2-積累。碳源充足,NarNir會競爭底物,且NaR競爭力更強(qiáng),NO3-會優(yōu)先還原為NO2-,造成NO2-積累。在啟動階段,1~2d,2NO2--N積累較高,由于NiR的合成與誘導(dǎo)時間晚于Nar,因此,運(yùn)行初始出現(xiàn)NO2--N積累,同時也證明2組反硝化菌生長成功。由此可知,在階段I,1號出水COD/N均值大于4,碳源充足,NO2--N積累平均質(zhì)量濃度低于1mg?L-12號出水COD/N均值小于4,碳源不足,24~50d,NO2--N積累較多,最大積累量為12.79mg?L-1,之后逐漸降低并穩(wěn)定至1mg?L-1以下。在階段II,1號出水COD/N降至4以下,碳源不足,78~98d出現(xiàn)NO2--N大量積累,最大積累量為11.62mg?L-1,之后逐漸減少并穩(wěn)定至2.5mg?L-1左右;2號出水COD/N依然較低,NO2--N平均積累質(zhì)量濃度為1mg?L-1。碳源不足時,2組均出現(xiàn)NO2--N大量積累,但大量積累是暫時的,這與鐘勝強(qiáng)等和張恒亮等實(shí)驗(yàn)情況類似。此外,51~73d74~105d,2TN削減量均值為23.7119.04mg?L-1,變化不顯著,因此,51~105d,2NO2--N積累變化不大??傊?,耦合體系TN去除過程雖有一定NO2--N積累,但大量積累時間不長,穩(wěn)定積累量不高,通過后接曝氣設(shè)施可減少NO2--N危害。

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植物碳源中的N經(jīng)生物作用后會釋放NH4+。當(dāng)有機(jī)電子供體遠(yuǎn)高于受體NO3-時,NO3-易異化還原成NH4+(DNRA)。同時,Fe0生物系統(tǒng)中NO3-可化學(xué)還原為NH4+。圖4(b)為實(shí)驗(yàn)裝置NH3-N積累情況??梢钥闯觯?/span>0~5d,2組出水NH3-N較高,之后隨著有機(jī)物釋放的減少與穩(wěn)定,2組出水NH3-N也隨之減少和穩(wěn)定;12d后,2組出水NH3-N平均質(zhì)量濃度均低于1mg?L-1。由此可知,0~5d,2組出水COD遠(yuǎn)高于TN,因此,前幾天NH3-N較高主要是因?yàn)樘荚瘁尫排cDNRA反應(yīng)所致。另外,在階段II(73d),1號出水NH3-N增加,此時期1號出水COD雖有少量增加,但出水COD/N較低,排除DNRA的影響。已有研究顯示,Fe2+易將生物還原型NO2-化學(xué)還原為NH4+((2)),并形成Fe2+-Fe3+水合氧化物,其中的Fe2+會繼續(xù)與NO3-NO2-化學(xué)反應(yīng)生成NH4+。在階段II,NO3-增加,加劇了鐵的腐蝕,釋放更多Fe2+((3)~(5))以及NH4+((5))。此時1號碳源缺乏,積累的生物還原型NO2-和殘余NO3-增多,導(dǎo)致NH4+進(jìn)一步增加。由于鐵腐蝕有限,故NH4+增加不多,加上材料自身釋放的增加,最終導(dǎo)致73d1NH3-N升高。整體而言,耦合體系出水NH3-N雖然略高于單純固相反硝化體系,但并未出現(xiàn)NH3-N的明顯積累。

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2.4 總鐵的釋放

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5為實(shí)驗(yàn)裝置進(jìn)出水總鐵濃度變化情況。由于進(jìn)水與2號出水總鐵基本低于檢測線,故主要討論1號出水總鐵情況。在啟動階段,1號出水總鐵先升高后快速降低,運(yùn)行12d后,總鐵釋放穩(wěn)定,出水總鐵為(0.26±0.09)mg?L-1,整體低于地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)限值0.3mg?L-1(GB3838-2002)。耦合體系總鐵的釋放主要源于鐵屑腐蝕。在啟動階段,鐵屑在水中發(fā)生氧化、生物腐蝕,生成大量的Fe2+Fe(OH)2,導(dǎo)致前幾天出水總鐵較高。但鐵屑表面的生物膜會減少物質(zhì)交換而阻礙腐蝕,其表面生成的鐵氧化物或氫氧化物會使鐵鈍化而失去活性,一些微生物會利用Fe2+還原NO3-,產(chǎn)生Fe3+,促進(jìn)鐵氧化物沉淀,進(jìn)一步抑制腐蝕。因此,隨著裝置的運(yùn)行,總鐵質(zhì)量濃度迅速減少。然而鐵的釋放并未停止,有研究指出,當(dāng)水中硝酸鹽質(zhì)量濃度大于10mg?L-1時,不穩(wěn)定的腐蝕產(chǎn)物(β-FeOOH)容易脫落促進(jìn)腐蝕??傊诟黝惿锘瘜W(xué)活動,鐵屑的腐蝕與抑制腐蝕作用處于一定的平衡,使得裝置內(nèi)總鐵在運(yùn)行12d后基本維持在較低質(zhì)量濃度范圍。鐵過高,會對微生物造成損傷,較低的鐵釋放保證了耦合體系強(qiáng)化脫氮的長期作用。

另外,鐵型反硝化菌可以Fe2+為電子供體將NO3-/NO2-還原為N2,但反應(yīng)Fe/N比為(3~5):1,而1號總鐵均值約為0.3mg?L-1。鐵自養(yǎng)反硝化雖可提高脫氮效能,但不是耦合體系TN去除的主要途徑。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,鐵屑強(qiáng)化反硝化包括3個過程:1)鐵屑腐蝕,生成Fe2+及其氧化物,反應(yīng)式見式(3)~(5);2)Fe2+氧化,形成Fe(OH)3、FeOOHFe2O3、Fe3O4等氧化物,反應(yīng)式見式(2)、式(6)~(8);3)Fe2+、Fe3+及其各類氧化物是提升反硝化的關(guān)鍵,它們可強(qiáng)化微生物繁殖、活性、豐度和多樣性等,減少有機(jī)質(zhì)流失,提高電子傳遞效率等。而鐵離子與有機(jī)物間鰲和/絡(luò)合反應(yīng)可促進(jìn)系統(tǒng)與鐵的作用,多種因素綜合影響,最終表現(xiàn)為:改善碳源釋放,增強(qiáng)脫氮效能。但目前Fe0生物系統(tǒng)強(qiáng)化脫氮機(jī)理復(fù)雜,尚不明確,還有待進(jìn)一步深入研究。

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2.5 竹刨花填料表面生物膜形態(tài)

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6為竹刨花被利用前后表面掃描電鏡圖。被利用前的竹刨花(6(a)和圖6(b))由于加工原因和竹纖維結(jié)構(gòu)特點(diǎn),有許多不規(guī)則碎片與孔隙,利于微生物附著生長。被利用近100d后,1號和2號竹刨花均附著有微生物。這些微生物主要為桿狀,已有研究顯示,固相碳源被利用后,其表面微生物多呈桿狀。但1號竹刨花表面(6(c)和圖6(d))有許多交錯黏結(jié)、大小不一的纖維絮體,同時微生物與微生物、微生物與纖維絮體之間黏附團(tuán)聚,形成更為緊密的生物膜。而2號竹刨花(6(e)和圖6(f))被利用后,表面雖有一些殘余纖維絮體,但數(shù)量少,表面相對平整,微生物分布也更加稀疏。密實(shí)的生物膜利于纖維素分解與污染物的去除,鐵一方面刺激了微生物的生長及其胞外物的分泌,強(qiáng)化微生物、纖維絮體等的黏附,同時鐵離子及其氫氧化物的絮凝作用進(jìn)一步將浸泡分解出的竹纖維絮體吸附截留,增加微生物附著點(diǎn),減少有機(jī)質(zhì)流失,提高有機(jī)物的利用率。

2.6 Alpha多樣性分析

Alpha多樣性指數(shù)可表征微生物多樣性,結(jié)果見表1。2組樣本的覆蓋率指數(shù)均大于0.99,表明該測序結(jié)果能較好反映菌群的真實(shí)情況。Chao1值越大,群落豐度越好。2組樣本Chao1指數(shù)都大于2000,說明2體統(tǒng)均具有復(fù)雜的群落豐度,但1號群落豐度明顯高于2號。Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)和系統(tǒng)發(fā)育樹指數(shù)反映群落的多樣性,受樣品群落中物種豐度和物種均勻度的影響。Shannon指數(shù)和系統(tǒng)發(fā)育樹指數(shù)越大,Simpson指數(shù)越小,則菌群多樣性越高。1號的Shannon指數(shù)和系統(tǒng)發(fā)育樹指數(shù)均高于2號,而Simpson指數(shù)低于2號,說明1號耦合體系內(nèi)生物多樣性高于2號單純固相反硝化體系。

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2.7 微生物的分布特征

1號與2號竹刨花填料表面微生物門水平群落組成如圖7(a)所示。2體系細(xì)菌門類主要為變形菌門Proteobacteria(49.75%~66.51%)、放線菌門Actinobacteria(11.39%~12.38%)、擬桿菌門Bacteroidetes(11.21%~12.93%),厚壁菌門Firmicutes(3.27%~4.70%)和綠彎菌門Chloroflexi(1.65%~3.77%)等。2體系優(yōu)勢門為變形菌門,但1號變形菌門占比(65.51%)明顯高于2(49.75%)。此外,2號疣微菌門Verrucomicrobia豐度(8.80%)遠(yuǎn)高于1(小于1%)。變形菌門是各類水環(huán)境反硝化微生物的主導(dǎo)門類;擬桿菌門主要由水解菌組成,可降解纖維素在內(nèi)的大分子有機(jī)物;放線菌門是絲狀菌,具有絮凝作用,可降解氨基酸等;厚壁菌門可降解纖維素和進(jìn)行反硝化;綠彎菌門常見于各類污水處理中,是反硝化主要菌種之一;疣微菌門在活性污泥中較為常見,其與有機(jī)物、氨氮降解有關(guān)。總體而言,變形菌門、擬桿菌門、放線菌門、綠彎菌門、厚壁菌門普遍存在于植物碳源反硝化系統(tǒng)中,是反硝化主要參與者,2體系這些門類占比均高于80%,說明2體系TN去除主要為生物反硝化。2體系均存在降解有機(jī)物的微生物,如擬桿菌門、放線菌門、疣微菌門等。由于2號疣微菌門豐度較大,其有機(jī)物降解相關(guān)門類(門水平,豐度>5%)的總占比高于1號,說明鐵屑未促進(jìn)有機(jī)物降解相關(guān)門類生長。由于1號菌群總豐度、多樣性、生物膜條件比2號更好,說明是各類因素的共同作用增強(qiáng)了耦合體系碳源釋放。另外,嚴(yán)子春等發(fā)現(xiàn),富鐵生物系統(tǒng)中疣微菌科豐度與空白組相比,顯著降低,這與本研究類似,表明鐵會抑制疣微菌門/科的生長。2體系門類差異最大的為變形菌門(1號較高),其次為疣微菌門(1號較低),說明鐵屑強(qiáng)化了脫氮功能菌的生長。

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7(b)為竹刨花填料表面微生物屬水平群落組成情況。由于一些序列不能歸入已知屬,本數(shù)據(jù)庫以Family()后綴-uncultured,-unclassified來表示。變形菌門是2體系占比最大、差異最顯著的門類。表22體系變形菌門主要屬組成(屬,豐度>1%),1號和2號變形菌門中優(yōu)勢菌屬分別為假單胞菌屬Pseudomonas和熱單胞菌屬Thermomonas。已有研究表明,PseudomonasDenitratisoma、ThermomonasXanthobacteraceae_unclassified、Rhodocyclaceae_unclassifiedRhodocyclaceae-unculturedDesulfovibrio、Rhizobiaceae_unclassified、DevosiaBataproteobacteria_unclassifiedGammaproteobacteria_unclassified均是與反硝化有關(guān)的微生物。由表2可知:1號變形菌門中反硝化功能菌群共有9個類別(2中標(biāo)記為DNB(denitrifyingbacteria)的菌屬),總占比為35.75%;2號共有4個類別(2中標(biāo)記為DNB的菌屬),總占比為23.89%,表明耦合體系具有更多類別的反硝化菌群和占比,這有利于系統(tǒng)的穩(wěn)定與強(qiáng)化脫氮。

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另外,與其他脫氮菌不同,1號優(yōu)勢菌屬Pseudomonas是一種同步脫氮除磷菌。已有研究顯示,富鐵環(huán)境可明顯促進(jìn)Pseudomonas菌的生長并提升氮磷的去除率。當(dāng)進(jìn)水TP(1.14±0.06)mg?L-1時,0~105d1號和2TP的平均去除率分別為75%44%。因鐵屑釋鐵少,故生物同步脫氮除磷是1號高效除磷的重要線索,也表明鐵屑在誘導(dǎo)同步脫氮除磷菌方面潛力巨大。

此外,1號變形菌門中硫桿菌Desulforhabdus占比為1.05%,而2號未檢測到該菌屬。已有研究顯示,基于反硝化顆粒污泥的亞鐵型厭氧鐵氧化系統(tǒng)中的硫桿菌在Fe2+的氧化過程中起著重要作用。這證實(shí)耦合體系中存在Fe2+氧化反硝化,其可促進(jìn)TN的去除,但硫桿菌豐度較小,說明Fe2+氧化反硝化不多,這與耦合體系總鐵釋放情況基本一致。

3、結(jié)論

1)進(jìn)水TN41.62~59.95mg?L-1COD/N<0.5、水力停留時間為18h時,13~105d,耦合體系碳源較單純固相反硝化體系豐富,但2體系出水COD均值均低于一級A限值;耦合體系TN平均去除率為73.21%~92.79%,總體較單純固相反硝化體系高近1倍,出水TN可達(dá)到地表水IV類標(biāo)準(zhǔn);另外,耦合體系中鐵釋放穩(wěn)定,出水總鐵均值低于地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)限值。

2)SEM表征結(jié)果顯示,竹刨花表面植物組織碎片與孔隙較多,適于微生物附著生長;被利用近100d后,耦合體系竹填料表面明顯黏附有許多纖維絮體,黏性物質(zhì)與微生物數(shù)量更多,生物膜生長更加密實(shí)。

3)16SrRNA表征結(jié)果顯示,耦合體系與單純固相反硝化體系相比,微生物豐度與多樣性更高。2體系反硝化脫氮相關(guān)門類占主體,優(yōu)勢門類均為變形菌門,但耦合體系變形菌門豐度更高;在變形菌門主要屬組成中,耦合體系反硝化菌群(屬水平,豐度?1%)類別和總占比均高于單純固相反硝化體系。這與耦合體系高效、穩(wěn)定的脫氮效果基本吻合。(來源:湖北省自動化研究所股份有限公司,武漢江城澤源生態(tài)工程技術(shù)有限公司)

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